大鼠細(xì)胞ELISA試劑盒誤差率降低的有效方法

　　大鼠細(xì)胞ELISA試劑盒已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測(cè)定，根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果，認(rèn)為ELISA法具有靈敏、特異、簡(jiǎn)單、快速、穩(wěn)定及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn)。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查，而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,因此，也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。

　　大鼠細(xì)胞ELISA試劑盒誤差率降低的有效方法：

　　一、檢驗(yàn)技師。應(yīng)具備從事實(shí)驗(yàn)室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。能熟練操作實(shí)驗(yàn)儀器、器械，具有一定總結(jié)和分析問(wèn)題的能力，對(duì)實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的意外情況能及時(shí)妥善解決。

　　二、使用校對(duì)過(guò)的微量移液器，排除自然誤差。移液器準(zhǔn)確與否對(duì)定量檢測(cè)尤為重要。

　　三、仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū)。嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行規(guī)范化操作。大鼠細(xì)胞ELISA試劑盒不同批號(hào)的試劑不可混用。值得改進(jìn)的地方，反復(fù)試驗(yàn)確定成立后才能改進(jìn)。

　　四、洗滌干凈。洗板不干凈，酶結(jié)合物本底顯色會(huì)呈現(xiàn)假陽(yáng)性。洗滌液要新鮮，現(xiàn)用現(xiàn)配，陳舊的洗滌液會(huì)出現(xiàn)本底增高現(xiàn)象，也可能出現(xiàn)假陽(yáng)性。

　　五、嚴(yán)控反應(yīng)時(shí)間。反應(yīng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，酶失活；反應(yīng)時(shí)間過(guò)短，酶結(jié)合物不能與血清中的微生物抗原抗體充分結(jié)合，生成物結(jié)構(gòu)松散不牢固，容易洗掉，都可能造成假陰性。

　　六、注意大鼠細(xì)胞ELISA試劑盒保存期，過(guò)保存期的試劑不能使用。

　　七、評(píng)估試劑的實(shí)用性。試劑的穩(wěn)定與否，對(duì)準(zhǔn)確率的高低到頭重要。在試劑啟用前，應(yīng)進(jìn)行陰、陽(yáng)對(duì)照及樣品反復(fù)比照試驗(yàn)，判定試劑符合要求后方可使用。

　　八、嚴(yán)格掌握顯色時(shí)間。顯色時(shí)間過(guò)短，加入終止液反應(yīng)終止后，底物結(jié)合物的量過(guò)少，易出現(xiàn)假陰性。超過(guò)顯色要求時(shí)間后顯色，應(yīng)判為假陽(yáng)性，這可能與試劑本身有關(guān)。加顯色劑后立即顯色，不可報(bào)陽(yáng)性，這可能是本底顯色的結(jié)果。

　　九、加樣要準(zhǔn)確、快速。如果加樣不準(zhǔn)確，酶生成物的量不能確定，大鼠細(xì)胞ELISA試劑盒直接影響顯色結(jié)果。顯色的深淺及A值的測(cè)定與加入顯色劑和終止液的量有關(guān)，所以加樣應(yīng)慎重。